Другим, запрещенным в 2009 г., видом генного допинга, является AICA ribonucleotide или AICAR (aminoimidazole carboxamide ribonucleotide) — интермедиат (промежуточный продукт) генерирования инозинмонофосфата, выступающего в качестве агониста АМР-активированной проте-инкиназы (АМРК) (Corton al., 1995). Субстанция AICAR стимулирует поглощение в скелетных мышцах глюкозы и увеличивает экспрессию р38-митоген-активированной протеинкиназы типов а и β (Lemieux et al., 2003), а также предотвращает процесс апоптоза путем торможения образования свободных радикалов, прежде всего химически активного атомарного кислорода, внутри клетки (Kim et al., 2008). Следует отметить, что достаточно давно биохимиками-теоретиками на молекулярном уровне установлена связь между действием АМРК и функционированием Na+-K+-АТФ-азы (натрий-калиевый насос), гидролизующей с образованием энергии 25 % всех запасов АТФ в клетке. Потому активность АМРК является сверхчувствительным сенсором энергозависимых процессов и отображает процессы выработки энергии и, в частности, нижней границы образования АТФ, инактивируется увеличением нижней границы соотношения АМФ/АТФ (Lingrel, Kuntzweiler, 1994).
По химической структуре AICAR является комплексом соединения на основе имидазольного кольца с рибонуклеотидом, а именно 5-амино-имидазол-4-карбоксиамид-1 -β-D-рибофуранозидом (рис. 3.19).
Химическая структура AICAR
В 2008 г. исследователи Института Солка под руководством Дж. Кима обнаружили что AICAR, в зависимости от интенсивности нагрузки, при использовании его в течение четырех недель у экспериментальных мышей значительно повышает их работоспособность на тредмиле в упражнениях на выносливость путем, по-видимому, преобразования быстросокращающихся мышечных волокон в более энергоэффективные, липидогенерирующие, медленносокращающиеся мышечные волокна. Было показано, что этот процесс опосредован торможением пальмитат-индуцированной клеточной смерти (апоптоза) эндотелиальных клеток путем угнетения процессов перекисного окисления липидов в них (Kim et al., 2008).
В эксперименте на крысиных и человеческих клетках установлено, что АМРК регулирует стимулированную при гиперкапнии накоплением С02 альвеолярную эпителиальную дисфункцию и соответственно улучшает легочную вентиляцию (Vadusz et al., 2008). Как показывают недавние исследования, в частности, проведенные на изолированных клетках миокарда и мышечных клетках, АМРК также стимулирует поглощение глюкозы этими структурами (Sugalen et al., 2007). Отсюда следует, что эффективные агонисты АМР-активированной протеинкиназы могут быть точкой приложения для стимуляции механизмов энергообеспечения. Как активатор АМР-активированной протеинкиназы, AICAR в эксперименте на животных увеличивает содержание свободных жирных кислот в обоих (быстрых и медленных) типах мышечных волокон через изменение уровней адипонектина и лептина (белков, участвующих в липидном обмене) и повышение содержания глюкозы в белых мышечных волокнах (рис. 3.20).
Влияние AICAR на активность АМРК в белых (а) и красных (б) мышечных волокнах (исследования проведены в основной и контрольной группах по 6 животных в каждой) (Sugalen et al., 2007) *Р < 0,01 по сравнению с контролем)
Кроме того, AICAR способствует увеличению содержания глюкозы, инсулина, свободных жирных кислот, а также снижению лактата в плазме крови экспериментальных животных (рис. 3.21). Последний факт может оказаться очень важным для понимания тонких механизмов энергообеспечения физической нагрузки и механизмов восстановительных процессов.
Влияние AICAR на содержание в плазме глюкозы, инсулина, свободных жирных кислот и лактата (исследования проведены в основной и контрольной группах по 14 животных в каждой, которым AICAR вводился подкожно) (Sugalen et al., 2007) *Р < 0,05, **Р < 0,01 по сравнению с контролем)
Следует отметить, что такие исследования велись одновременно в нескольких научных центрах. Так, еще в 2005 г. было показано, что 5-амино-имидазол-4-карбоксиамид-1 -β- D-рибо-фуранозид и фенформин активируют АМР-активированную протеинкиназу путем угнетения транспорта натрия в клетках легких, что является одним из путей поддержания баланса жидкости в тканях (Woollhead et al., 2005). AICAR способен также стимулировать фосфорилирование АМРК и активировать гликолиз путем увеличения поглощения глюкозы в клетках. В условиях низкого содержания глюкозы увеличение соотношения АМФ/АТФ стимулирует оба процесса в астроцитарных клетках мозга. Активация (через сложный биохимический механизм синтеза модулятора TSC2 и mTOR) этих сигнальных путей помогает сэкономить количество энергии, необходимой для синтеза белка и гликолиза, и, тем самым, предотвратить апоптоз нервных клеток (Mukheijee, 2008). Приведенные данные убедительно доказывают, что активация АМРК с помощью агонистов сопровождается выраженными многочисленными эффектами со стороны различных органов и систем, что и может объяснять многостороннее влияние модуляторов активности этого фермента на функциональное состояние организма.
Практически одновременно с исследованиями физиологической и биохимической активности AICAR, под руководством В. Наркара и Р. Эванса, были проведены эксперименты, показавшие, что у нетренированных мышей AICAR, особенно в сочетании с GW 1516, активирует около 40 % генов, которые включаются при реальных интенсивных физических нагрузках. Исследователи сделали вывод, что при совместном применении двух агонистов, возможно, удастся достичь эффекта тренировки без фактических физических нагрузок (Narkar et al., 2008). Результаты этих исследований были опубликованы как раз накануне Игр XXIX Олимпиады и косвенно указывали на возможность использования данных веществ в качестве допинга для стимуляции работоспособности и выносливости спортсменов. В связи с этим руководители исследования срочно разработали и передали в распоряжение МОК и WADA тесты для обнаружения AICAR в моче спортсменов. Такие действия исследователей никак не могут быть объяснены только желанием создать запрещенную в спорте субстанцию; скорее было обнаружено побочное действие веществ, тестируемых для создания новых терапевтических препаратов, которое выразилось в триггерных изменениях в организме, свойственных физической нагрузке, и улучшающих процессы энергообеспечения, особенно за счет липидов, а также повышения чувствительности к инсулину (Iglesias et al., 2004). В настоящее время совместно с Медицинской комиссией МОК и WAD А Р. Эванс и его сотрудники разрабатывают систему сертификации тестов, способных уловить присутствие метаболитов новых генных допингов — AICAR и GW 1516 — и ретроспективно тестировать спортсменов, участвовавших в Олимпийских играх в 2008 г., поскольку на момент проведения Игр методы допинг-контроля на присутствие обоих субстанций еще не были сертифицированы.
Когда в 2004 г. Р. Эванс и его коллеги провели генетическое модифицирование молодых мышей с изменением состава и структуры их мышц, то получили животных, практически вдвое более устойчивых к нагрузкам, чем обычные мыши. Эти "мыши-марафонцы" не набирали избыточную массу тела и не увеличивали объем мышц, имели низкий уровень сахара и высокий — свободных жирных кислот в крови, что сделало их, по выражению исследователя, "замечательными бегунами". Исследователи доказали, что можно перепрограммировать работу мышц, используя методы генетической инженерии у молодых животных. В интервью "Нью-Йорк Тайме" Р. Эванс подчеркнул, что неизвестно, можно ли делать с помощью лекарств такое генетическое перепрограммирование у взрослых особей, когда весь мышечный аппарат уже сформирован, и за короткое время необходимо изменить свойства большой массы скелетных мышц.
Исследователи считают, что преимущества, полученные при использовании AICAR и GW 1516, обусловлены взаимодействием между клеточными АМРК и PPAR-5 сигнальными путями. Данные генетического анализа подтверждают эту гипотезу относительно того, что AICAR и GW 1516 по отдельности активируют только незначительную подгруппу генов, экспрессируемых при физической нагрузке. При этом по отдельности агонисты и АМР-активированной протеинкиназы (AICAR), и пролиферирующего пероксисомного дельта-, а по некоторым данным, и бета-рецептора PPAR (GW 1516), могут имитировать некоторые показательные эффекты, присущие физической нагрузке. В то же время активация обоих путей (комбинация AICAR и GW 1516 с физической нагрузкой) приводит к экспрессии значительно большего числа генов, ремоделируюших большое количество метаболических путей в организме, в том числе, и метаболизм мышечной ткани (Lemieux et al., 2003).
В фундаментальной статье, написанной группой известных специалистов (Knopp et al., 1997), авторы обсуждали дискуссионные вопросы, связанные с неоднозначностью трактовки МОК и спортивными врачами понятия "генный допинг", а также пытались сформулировать, где же проходит граница между формальными и истинными границами разумности и обоснованности применения тех эргогеных средств, которые приводятся в постоянно расширяющемся Списке запрещенных веществ и методов. Поэтому история с появлением новых видов допинга, в настоящее время уже генного, далеко не нова.
Однако пока в клинических испытаниях не получено убедительных доказательств, к каким негативным эффектам может приводить использование AICAR и GW 1516, каковы могут быть разумные дозы и побочные эффекты препаратов на основе этих субстанций, а также могут ли полученные генетические модификации закрепляться и воспроизводиться, нельзя, вероятно, однозначно отвергать возможность использования препаратов на основе AICAR и GW 1516 в спорте, особенно высших достижений. Напротив, в книге "Генная и клеточная терапия" (Templeton, 2003) убедительно доказывается важнейшая роль генетических модификаций и использования субстанций, модифицирующих собственный ответ организма, при лечении многих тяжелых заболеваний, в частности, сахарного диабета типа II, атеросклероза, гемофилии, болезнях Альцгеймера и Паркинсона. В последних научных работах на эту тему приводятся данные, которые пока не доказывают присутствие негативных эффектов влияния AICAR и GW 1516 на сердечно-сосудистую и другие системы организма; напротив, авторы полагают, что препараты на этой основе могут стать "золотым стандартом" лечения заболеваний сердца и сосудов (Warden et al., 2008). Возможно, применение стимуляторов генетической активности открывает новую эру в развитии физических возможностей спортсменов и повышении зрелищности спортивных состязаний, особенно с учетом того, что предел собственных возможностей организма человека практически достигнут.
С постоянным ужесточением требований WADA можно дойти до полного абсурда, поскольку в состав очень широко распространенного препарата нафтизин для местного лечения насморка тоже входит... запрещенная субстанция! Стратегия WADA, по нашему мнению, в случае появления новых средств, влияющих на работоспособность, должна выражаться не в немедленном запрещении любых инноваций, способствующих повышению порога возможностей человека, а в разработке и повсеместном внедрении современного, адекватного, в том числе, и на генетическом уровне, алгоритма обследования всех спортсменов, рационально организованной фармакологической поддержке и медицинской помощи во время тренировочного и соревновательного процессов.
Английская "TIMES" 1 августа 2008 г. со своих страниц заявила, что "исследователи обнаружили и протестировали на мышах два вещества, способных существенно повысить силу и выносливость мышц. Одно из этих соединений продемонстрировало способность улучшать физические возможности животных даже в отсутствие тренировки". Руководитель исследования, сотрудник Института Говарда Хьюга Р. Эванс, как сообщала газета, некоторое время назад сумел вдвое повысить выносливость мышей, встроив в геном животных модифицированную версию гена ядерного клеточного рецептора PPAR-S (ППАР-дельта), регулирующего процессы метаболизма в клетках. Это было расценено как начало эры генного допинга. Затем Р. Эванс и его коллеги из Института биологических исследований Солка попытались достичь аналогичного эффекта при помощи экспериментальных лекарств. Путем длительного подбора ученые идентифицировали химическое соединение под названием GW 1516. Результат эксперимента оправдал ожидания лишь отчасти. Получавшие его мыши не демонстрировали никаких экстраординарных способностей без тренировки, однако после начала физических упражнений их сила и выносливость увеличивались значительно быстрее, чем у обычных мышей после таких же нагрузок. Однако, к сожалению, газета "TIMES" не упомянула, что GW 1516 был обнаружен в процессе изучения механизмов влияния антидиабетических препаратов нового поколения на синтез гликогена и утилизацию глюкозы (более ранее название GW1516 — GSK 516 — вполне может указывать на связь изучаемого вещества с действием фермента киназы гликогенсинтазы — ГСК, играющей важную роль в метаболизме углеводов).
За две недели до старта летнего чемпионата мира-2009 по легкой атлетике Антидопинговая комиссия Всероссийской федерации легкой атлетики (ВФЛА) со страниц своего официального сайта выступила с заявлением о том, что генный допинг, об опасности которого говорили последнее время в научных и спортивных кругах, выходит на широкий нелегальный рынок. В заявлении говорилось, что два препарата под названием GW 1516 и AICAR активно рекламируются в Интернете. Об этих препаратах как о потенциальной угрозе уже несколько лет предупреждают специалисты в области спортивной медицины и функционеры международных антидопинговых служб. Известный российский специалист по борьбе с допингом, глава медицинской комиссии Континентальной хоккейной лиги, а в прошлом глава антидопинговой службы Росспорта, Николай Дурманов присоединился к этому заявлению, подчеркнув в своих интервью для широкой общественности огромную опасность использования таких препаратов. В интервью Интернет-изданию "infox.ru" он рассказал, что такое GW 1516 и AICAR, и почему ВФЛА назвала этот допинг смертельным: GW 1516 и AICAR перестраивают работу генов в организме человека. Мыши, обработанные этими препаратами, бегают на 60—70 % дольше и дальше, чем их обычные собратья. Эти вещества влияют на гены мышечных клеток, и опыты на животных показали, что они якобы значительно увеличивают выносливость организма, многократно превосходя по своему действию все имеющиеся "традиционные" допинги. Ученые крайне озабочены тем фактом, что разрекламированные "магические" свойства этих препаратов приведут к их быстрому распространению в спортивном мире. При этом не было проведено достаточных исследований по влиянию препаратов на организм человека. В частности, большую настороженность вызывает потенциальное воздействие этих веществ на сердечно-сосудистую систему человека, что может привести к таким катастрофичным последствиям, как инфаркт миокарда. Специалисты-медики из Антидопинговой комиссии ВФЛА считают своим долгом предупредить спортсменов, тренеров, врачей о серьезной опасности, связанной с приемом этих веществ. Как отметил Н. Д. Дурманов, "пусть никого не обманывает легкомысленная реклама и искусственный ажиотаж вокруг этих генных допингов. Они смертельно опасны. К сожалению, в прессе и Интернете распространены заявления, что уже налажено подпольное производство запрещенного товара, так как сама структура этих веществ не очень сложная, и имеются указания, где их можно приобрести".
Когда сведения о AICAR и GW 1516 появились в научной литературе, средства массовой информации назвали их "таблетками зарядки". В самом обобщенном виде механизм их действия связан с воздействием на процессы выработки энергии. В частности, новые субстанции повышают образование и последующее окисление жиров (липидов), служащих одним из важных источников энергии при физической нагрузке, и увеличивают скорость кровотока, что обеспечивает стабильный транспорт липидов к местам их метаболизма. Кроме того, и AICAR, и GW 1516 связаны с процессами метаболизма углеводов — главной энергетической субстанцией при длительной физической нагрузке.
Еще в 2004 г. в российском Интернет-журнале "Коммерческая биотехнология" появилась научно-популярная статья А. Чубенко о генном допинге, в которой указывалось, что уже тогда под руководством Р. Эванса проводились исследования по модификации мышечных волокон. Однако целью поиска являлось совсем не повышение спортивных результатов. Посылка исследователей была совсем иной. Известно, что мышечные волокна делятся преимущественно на два типа: медленносокращающиеся, но выносливые, волокна типа I требуют хорошего снабжения кислородом и глюкозой и содержат много митохондрий; быстросокращающиеся волокна типа II быстро "устают", зато длительно способны работать в анаэробных условиях, получая энергию за счет распада гликогена. В любой мышце есть волокна обоих типов, однако в мышцах туловища, выполняющих в основном статические нагрузки, больше волокон типа I, в мышцах конечностей — типа II, приспособленных к динамическим нагрузкам. Склонность к ожирению и сахарному диабету II типа связана с уменьшением в мышцах именно волокон типа I, и ученые из двух калифорнийских и одного сеульского университетов под руководством Р. Эванса в поисках способа борьбы с ожирением создали "мышь-марафонца".
Биохимические механизмы превращения мышечных волокон из одного типа в другой под влиянием тренировочных занятий открыты совсем недавно. В частности, большую роль в таком превращении играет сигнальный белок PGC-1-а, один из кофакторов транскрипции коактиватора бета-рецептора (или, как его чаще называют, у-рецептора), который активирует пролиферацию пероксисом (transcriptional cofactor Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator) — PGC. PGC участвует в процессе пролиферации (роста и деления) митохондрий, активизируя белок PPAR5 — рецептор активатора пролиферации пероксисом. Вариант 8 выбрали потому, что другие изоформы того же белка в процессе превращения мышечных волокон намного менее эффективны: а — в 10, ay—в 50 раз. Чтобы проверить, как PPAR-5 повлияет на обмен веществ, ученые ввели в мышиные эмбрионы его модифицированный ген, соединенный с промотором (участком гена, дающим команду к его считыванию) человеческого актина — белка, который вместе с миозином обеспечивает сокращение мышц. Без этого ген мог бы заработать не в мышечной, а в любой другой ткани. Синтезированный в мышцах белок, с кровотоком попавший в жировую ткань, эффективно препятствовал ее росту и ускорял сжигание жира: через три месяца пребывания на "диете по Аткинсу" (35 % жира против обычных 4 %), трансгенные мыши растолстели втрое меньше, чем обычные. При этом структура мышечной ткани у них настолько изменились, что при биопсии это было видно невооруженным глазом. Из-за увеличения концентрации миоглобина трансгенные мышцы были заметно краснее, чем такие же мышцы обычных мышей. Число волокон типа I в них было намного больше обычного (например, в такой типично смешанной по составу волокон мышце, как икроножная, — в 2 раза). Концентрация ферментов, необходимых для окисления глюкозы и синтеза АТФ, тоже существенно возросла.
В заключение А. Чубенко отмечает, что на одной генетике, без тренировки, стройные и мускулистые трансгенные мыши при занятии на тредмиле могли бежать на 2/3 (на 1 ч) дольше и почти в 2 раза (на 1 км) дальше, чем обычные. И это результат работы всего одного из сотен генов, которые изучают в надежде разработать методы лечения наследственных заболеваний и которые можно использовать для создания генетически модифицированных спортсменов. О "мышах-марафонцах" писали много, тем более что в электронной версии журнала "PLOS Biology" статья о них появилась во время Игр XXVIII Олимпиады. Но в популярных изданиях от широкой спортивной общественности скрыли самое главное, а именно, что такое же снижение массы тела наблюдалось у обычных мышей, когда им через желудочный зонд вводили вещество под кодовым названием GW501516. О его составе в статье группы Р. Эванса не сказано — по понятным причинам: обычно такими буквенно-цифровыми индексами обозначают потенциальные лекарственные препараты, пока они не получат одобрения медицинских властей и торгового названия. Известно было только, что это агонист (позитивный модулятор) PPAR6. С момента появления в Интернет-изданиях этих статей интерес спортивных функционеров к использованию GW 1516 и AICAR многократно возрос.
Все известные до того момента виды генного допинга, начиная с использования рекомбинантного гена эритропоэтина, ускоряющего синтез эритроцитов и гемоглобина, и заканчивая модификацией ростового фактора эндотелия сосудов (VEGF) для ускорения роста новых капилляров и артерий и, соответственно, скорости кровотока, влияли на спортивный результат опосредованно. Новые разработки ученых привели к появлению средств, непосредственно влияющих на ключевые звенья успеха в спорте— механизмы энергообеспечения и качество и длительность эффективного мышечного сокращения. Не случайно вскоре после появления упомянутых статей (в российском Интернет-журнале "Коммерческая биотехнология" и в "PLOS Biology") тогдашний директор WAD А Ричард Паунд в интервью газете "Тайме" в феврале 2004 г. заявил: "Не думаю, что мы столкнемся с генным допингом в Афинах, и очень сомневаюсь насчет Олимпиады в Пекине в 2008 г. Но в 2012 это будет вполне возможно". Он несколько ошибся в прогнозе — это произошло гораздо раньше.
Оба упомянутых выше средства (никак нельзя назвать их препаратами, поскольку они еще не имеют торгового зарегистрированного названия), последствия действия которых были описаны в онлайн-режиме в научном журнале "Cell" 31 июля 2008 г., по состоянию на 1 января 2009 г. уже были внесены в пункт М 3 "Генный допинг" Списка запрещенных веществ и методов. И хотя ранее подразумевалось, что при использовании генного допинга используются инъекционные формы, два выше названных вещества могут употребляться в виде таблеток. Что представляют собою GW 1516 и A1CAR?
Анализ научных публикаций относительно упомянутых выше новых видов генного допинга (а корректнее — химических субстанций) показал, что GW 1516, реже называемый GW-501516, или GSK-516 (в русскоязычной литературе иногда ГСК 1516), является агонистом активатора пролиферирующего пероксисомного 5-рецептора (Peroxisome proliferator-activated receptor-6). Пероксисомы — клеточные органеллы, с помощью которых организм избавляется от токсических веществ. Пероксисом-пролифератор-активирующие рецепторы — это семейство (PPARs) компактных белковых молекул, имеющих в своем составе около 500 аминокислотных остатков и расположенных вблизи ДНК внутри ядер клеток (Desvergne et al., 1999; Endemann, Schiffrin, 2004). Пролифераторы, т. е. активаторы пероксисом, действуют именно через PPAR. Известно, что в молекулярной биологии семейство этих рецепторов, включающее а-, р- (в США последние называют у) и 6-формы PPAR, представляют собой группу ядерных рецепторов белков, которые функционируют как транскрипционные факторы, регулирующие экспрессию генов (многоступенчатый процесс преобразования генетической информации в функциональный продукт, обычно белок), в ответ на связывание соответствующими активаторами - лигандами (рис. 3.17).
Структура PPAR-рецептора и связывание его с лигандами
PPARs активируются, связываясь с лигандами, и затем присоединяются к специфическим участкам ДНК. При связывании со специфическим лигандом PPAR изменяет свою конформацию (структуру), что позволяет включать один или несколько белков-активаторов. Каждый из PPARs управляет активностью определенного ансамбля генов, контролирующих многие процессы внутриклеточного обмена, рост и апоптоз (запрограммированная клеточная смерть) некоторых клеток, и ряд патологических процессов, в частности, воспаления и канцерогенеза. PPARs имеют важное значение в регуляции дифференцировки клеток, транкрипции (считывании информации, заложенной в генах), метаболизме углеводов, липидов, белков у высших организмов. Все PPARs в молекулярном плане тесно связаны с определенными ДНК-сгруктурами (нуклеотидными последовательностями) различных генов, что и дает возможность PPARs влиять на их транскрипцию и экспрессию (Feige et al., 2006). Функции PPARs могут варьировать в зависимости от способа прикрепления их лиганда к промоторной части гена, а также от количества коактиваторов и корепрессоров (веществ, способствующих угнетению функции) белков, наличие которых может стимулировать активность или препятствовать функционированию перокисомного рецептора (Yu, Reddy, 2007).
Когда оказалось, что PPARs играют гораздо более многогранную роль в жизнедеятельности высших организмов, агенты, активирующие PPAR, были названы лигандами. PPAR5 преимущественно содержится в печени, почках, миокарде и скелетных мышцах, жировых тканях, а у- и 6-формы PPAR преобладают в жировой ткани и коже, а также в эндотелии сосудов. Поскольку у-рецепторы имеют три подвида (yl, у2 и уЗ), экспрессирующиеся в различных тканях, то следует уточнить, что у, присутствует практически везде, но особенно заметно его действие в сердце, мышечной ткани, тонкой кишке, почках, поджелудочной железе и селезенке. PPAR-y2 максимально экспрессируется преимущественно в бурой жировой ткани, а уЗ — в макрофагах, толстом кишечнике, белой жировой ткани (Berger, Moller, 2002). Эти агонисты (PPARa и -у) были обнаружены в начале 80-х годов XX в. в ткани печени лягушек и грызунов во время поиска молекулярной мишени для группы агентов, называемых "пероксисомы", для увеличения чувствительности тканей к инсулину (Dreyer et al., 1992). В 1992 г. в организме человека были найдены PPAR5 (Schmidt et al., 1992), которые находятся в равной мере во всех тканях организма. Их функция также связана с регуляцией жирового обмена (Collins et al., 2001).
PPARa и PPARy являются молекулярной мишенью многих разрешенных препаратов, в частности, как указывалось, на основе фибратов и тиазолидиндионов. Для PPARa такими агентами являются, во первых, фибраты (гемфиброзил, уфибрат, безофибрат и т. д.), широко распространенные в лечении сердечно-сосудистых заболеваний, сахарного диабета II типа, ожирения, а, во-вторых, нестероидные противоспалительные средства (НПВП), особенно часто используемые для снятия болевого синдрома, связанного с повреждением мышечных и костно-суставных структур. Для PPARy, повышающих чувствительность к инсулину, синтетическими активаторами также являются прежде всего тиазолидиндионы, в меньшей степени — фибраты (Buzzetti et al., 2004; Meirhaeghe et al., 2004).
В организме одними из важнейших лигандов для PPARs являются свободные ненасыщенные жирные кислоты с длинной цепью: линолевая, линоленовая и арахидоновая (в основном для с-формы) и эйкозаноиды (предшественники и метаболиты простагландинов и других сходных по структуре биологически активных веществ). Например, PPARy активируется простагландином PGJ2, a PPARa — медиатором воспаления лейкотриеном В4 (Haraguchi et al., 2003).
PPARs играют важную роль в метаболизме свободных жирных кислот, триацилглицеролов и холестерола в организме. Активация а-формы PPAR, посредством изменения активности транскрипции генов, участвующих в метаболизме липопротеидов, способствует снижению содержания атерогенных ЛПНП в сыворотке крови, повышает активность транспорта холестерола из периферических тканей в печень. В эксперименте показано, что при дефиците PPARa в условиях голодания концентрация глюкозы в крови через 24 ч снижается на 50 %, что свидетельствует о важной роли PPARa в гомеостазе глюкозы. PPARa обладают также противовоспалительными эффектами. Эти свойства были документально подтверждены главным образом в экспериментах in vitro, а также в опытах на животных.
Что касается действия веществ, усиливающих действие PPARs, то недавно было продемонстрировано, что у пациентов с сахарным диабетом П типа агонисты PPARa фибратной структуры уменьшают риск возникновения инфаркта миокарда и снижают частоту необходимости проведения коронарной реваскуляризации, что свидетельствует о благоприятных эффектах этих препаратов у данной категории пациентов. В модельных исследованиях с изолированными человеческими клетками на фоне стимуляции избыточной экспрессии PPARa до настоящего времени не выяснено, приводит ли активация PPARa к нежелательным эффектам со стороны сердца у людей, как это отмечалось в эксперименте на животных. Отсутствуют также какие-либо убедительные научные свидетельства о том, что терапия агонистами PPARa способна увеличить риск развития хронической сердечной недостаточности у человека (Kim et al., 2006).
Известно, что генный допинг на основе тиазоли-диндионов, а именно пиоглитазон и троглитазон (последнее поколение — розиглитазон, торговое название Авандия), являются одними из самых современных для лечения сахарного диабета II типа. Они повышают чувствительность тканей к инсулину, позволяя контролировать уровень глюкозы. Активация PPARy с помощью этих препаратов регулирует транскрипцию инсулин-чувствительных генов, участвующих в контроле синтеза, транспорта и утилизации глюкозы. Кроме этого, лиганды PPARy на основе тиазоли-диндионов влияют также на регуляцию обмена жирных кислот. Однако препараты этого класса имеют некоторые побочные эффекты, например, гепатотоксичность, особенно при превышении терапевтической дозы.
GW 1516, вокруг которого за столь короткий период сломано столько копий, по структуре представляет собой 2-[2-метил1-4-([4-метил-2-(4-(трифлуорометил)фенил)-1,3-тиазол-5-ил] метилсульфанил-феноксиацетат с молекулярной массой 453,498 г моль"1 (рис. 3.18).
Химическая структура GW 1516
На сегодняшний день метаболизм, биодоступность, период полужизни, пути экскреции, тератогенные эффекты и терапевтические дозировки GW 1516 не описаны. Разработана эта субстанция совместно сотрудниками институтов Хьюга и Солка в Сан-Диего по заказу фармацевтической корпорации "GlaxoSmith Kline" под руководством Р. Эванса. Уже одно упоминание о фармацевтической компании, занимающей одно из лидирующих мест в мире по производству многих жизненно необходимых препаратов, указывает, что никто специально не занимался разработкой допинговых субстанций, и задачи исследования были чисто терапевтическими. Первые сообщения именно об этом веществе появились в биохимической научной литературе в 2003 г. (Sznaidman et al., 2003). Оно, как свидетельствуют результаты исследований, опубликованные только в феврале 2008 г., продемонстрировало у страдающих ожирением мужчин с предиабетом возможность обратной трансформации возникших метаболических аномалий путем, вероятнее всего, стимулирования окисления свободных жирных кислот (Risurus et al., 2008). GW 1516 активирует аденозинмонофосфат-активированную протеинкиназу (фермент, участвующий в процессах энергообеспечения) и таким образом стимулирует поглощение глюкозы тканями скелетных мышц, а также утилизацию свободных жирных кислот (Kremer et al., 2007). В настоящее время проводится II фаза клинических испытаний относительно возможности использования GW 1516 в качестве средства для профилактики атеросклероза и лечения дислипидемий.
Когда в 2008 г. результаты экспериментов показали возможность повышения работоспособности на 68 % путем использовании GW 1516 при беге мышей на тредмиле, то еще до Игр XXIX Олимпиады были высказаны опасения относительно использования данного вещества в качестве допинга (Narkar et al., 2008). Тогда же Р. Эванс, руководивший экспериментальными исследованиями по изучению влияния GW 1516 на различные физиологические процессы в организме, в том числе, и на работоспособность, разработал тесты для обнаружения этой субстанции в моче и предоставил соответствующую информацию в распоряжение МОК и WADA medical-weight-loss-guide.com/AICAR.html..
Сочетание GW1516 и Aicar создает уникальную и весьма эффективную комбинацию, рассчитанную на повышение выносливости, очень быстрое сжигания жира, и значительное увеличение мышечной массы. С помощью данных средств за короткие сроки вы сможете повысить свои спортивные результаты и поднять уровень вашей физической подготовки. Свойства GW1516 и Aicar GW1516 способен сократить количество жира, который находится в вашем организме, и, что немаловажно - без одновременной потери мышечной массы. При использовании GW1516 и Aicar вместе, в скором времени вы заметите, что ваша выносливость стала в разы выше, лишние килограммы сброшены и ваш внешний вид, ровно как и физическое состояние, стало намного лучше. Оказывает эффективное воздействие на организм и способствует: сдвигам метаболизма ( для сжигания жира с целью его использования при получении энергии); увеличению выносливости; обеспечивает невероятным толчком для повышения выносливости; защищает от сердечно-сосудистых заболеваний; увеличивает мышечную массу.
Cardarine (GW 501516 или просто GW 1516) является препаратом, связывающим PRAP рецепторы. Впервые он был создан в 1992 Glaxo Smith Kline и Ligand Pharmaceuticals. Было обнаружено, что Кардарин при связи с PRAP рецепторами вовлекается в активацию фермента PGC-1α, который затем принимает участие в экспрессии генов, отвечающих за расход энергии. Получавшие Cardarine крысы имели усиленный метаболизм жирных кислот, а также повышенную сопротивляемость к ожирению даже при питании несбалансированной пищей, при этом сопротивляемость появлялась даже к диабету 2-го типа.
В другом исследовании, на макаках, было отмечено влияние Кардарина на холестерин: холестерин высокой плотности (хороший) поднимался, а низкий (плохой) опускался. Причиной образования данного эффекта является повышенная экспрессия гена, отвечающего за транспортировку холестерина ABCA1. Другими словами, Cardarine активирует те же самые генетические принципы, которые запускаются во время тренировки. Кроме того, Кардарин проходил исследования в качестве препарата для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, пока его разработка не была закрыта в 2007-м году.
Для чего используется GW1516?
Кардарин в бодибилдинге отлично подходит почти для всего! Главным преимуществом его использования является развитие невероятной выносливости. Данный эффект оказывается возможным не только в научных выкладках, но и на практике. Результат окажется не иначе, как удивительным! Если вы фанат кардио или просто хотите сбросить вес, он поможет увеличить время сессии. Ваши тренировки станут значительно длиннее, энергия не будет вас покидать на протяжении длительного периода времени, и вы сможете сделать намного больше силовой работы, прежде чем выйдите за пределы тренажёрного зала. И так каждый день.
Конечно, потеря жира является главной причиной, из-за которой так много людей обожают Cardarine. Рельеф и венозность становятся более заметными, и ваше путешествие по жиросжиганию становится намного проще, без каких-либо катаболических эффектов, присущих другим жиросжигателям и препаратам, за счёт чего они и работают. Жиросжигающий эффект Кардарина обусловлен повышенным расходом глюкозы скелетными мышцами. По сути, вы просто получаете возможность более эффективного расходования питательных веществ, которые потребляете каждый день, при этом уменьшая процент жиров и углеводов, запасающихся в виде жировой ткани. В конечном счёте, GW 501516 не только жиросжигатель или анти-катаболик, но ещё и немного анаболик в том числе.
Cardarine сочетается практически с чем угодно, тем самым усиливая результаты циклов. Для пользователей андрогенно-анаболических стероидов, которым нравится Тренболон, Кардарин является фантастическим антагонистом побочных «треновых» эффектов, при этом даже усиливая его положительные эффекты.
Дозировки GW501516:
Cardarine придаёт преимущество развитию выносливости и окислению жиров уже при дозировке в 10-15мг ежедневно, а идеальный его курс равняется по длительности 8 неделям; тем не менее, 20мг на протяжении 8-12 недель является рекомендованной дозировкой для тех, кто настроен на абсолютно оптимальной результат в тренажёрном зале или вне его. Кардарин является запрещённым веществом в некоторых видах спорта, поэтому рекомендуется быть осторожным в том случае, если вы будете проходить допинг-тестирование.
Положительные эффекты GW501516 и научные данные.
Все всегда задаются вопросом - где доказательства того, что Cardarine полезен для моего здоровья? Итак, парни, давайте рассмотрим исследования:
Выводы: данные показывают, что активация PPARβ/δ может быть полезна в вопросе предотвращения разрушительного эффекта эндоплазматического ретикулярного (ЭР) стресса, вызванного наличием жирных кислот в сердце, образованных в следствии аутофагии.
Объяснение: простыми словами, данное исследование показало, что Кардарин может быть полезен в предотвращении сердечных приступов.
Выводы:в целом, данные результаты показывают, что PPARβ/δ предотвращают ЭР стресс, воспаление и инсулиновую резистентность в скелетных мышцах путём активации AMPK.
Объяснение: если говорить просто, данное исследование доказывает облегчение Кардарином влияния стресса на организм, уменьшая воспалительные процессы и помогая предотвратить диабет.
Побочные эффекты Cardarine.
GW 501516 практически не обладает побочными эффектами. И хотя некоторые исследования на мышах (но не на людях) отмечали небольшое повышение риска развития рака, стоит понимать, что применяемые дозировки были просто чудовищными, которые и близко не являются рекомендуемыми для человека. В некоторых случаях применялись дозы, превышающие рекомендуемые в 1 000 раз! Очевидно, что употребление 1 000 таблеток чего угодно является опасным. Только представьте, что будет, если вы примете 1 000 таблеток Аспирина! Вы умрёте уже после первых 50. Таким образом, всегда воспринимайте информацию под определённым углом.
В конечном счёте, не существует действительно убедительных доказательств вреда Кардарина. Что интересно, другие исследования не выявили явной связи развития рака с препаратом, при этом дальнейшее изучение даже показало эффект уменьшения размера опухоли. Что доказывает эффективность Cardarine в борьбе с излечением некоторых видов рака.
Выводы
С какой стороны не посмотри, Кардарин является отличным оптимизатором производительности, который способен дать преимущество не только в тренажёрном зале, но и на «кухне», вне зависимости от того, преследует ли человек краткосрочные или долгосрочные перспективы. Вы можете использовать его в качестве поддержки против побочных эффектов тренболона, или же воспользоваться полным потенциалом GW 501516, и наконец-то добиться своих целей в построении рельефных мышц и сброса жира. Он стоит выше всех остальных и является одним из самых полезных инструментов фитнесса и здоровья на сегодняшний день.
В данной статье, я собираюсь остановиться на множестве способов и причин включения GW 1516 в каждый ваш курс, который вы планируете использовать. Для Кардарина найдётся место в любом цикле, независимо от желаемой цели. Он способен добавить дополнительных преимуществ, увеличивая тем самым шанс достижения ваших целей и прироста результатов.
Одной из многих проблем, которые я ежедневно наблюдаю в мире бодибилдинга, является слабая сердечно-сосудистая система и выносливость. Данная проблема достаточно распространена, и она не даёт человеку получить все преимущества от тренировки. Обладание возможностью быстрого восстановления во время сетов и поддержания интенсивности на протяжении всей тренировки, является ключевым элементом достижения целей. Когда вы находитесь на курсе, интенсивность невероятно важна, так как вы пытаетесь прорвать плато и достичь новых результатов. При добавлении к вашему курсу GW 501516 вы получаете шанс становиться на тренировках действительно сильнее, так как приобретаете возможность заниматься тяжелее и дольше, при этом с меньшим временем восстановления и значительно возросшей интенсивностью. Cardarine так же поможет выполнить те самые дополнительные повторения, за счёт чего из тренировки вы получите абсолютно всё возможное.
Прекрасной стороной Кардарина является отсутствие катаболических эффектов, таким образом он может быть использован для сжигания жира, без страха потерять и мышцы в том числе. Вы так же можете прекрасно сохранить свои мускулы, которые с таким трудом заполучили, и при этом даже увеличивая их за счёт повышения интенсивности тренировочных сессий.
Многие пользователи пытаются включить в курс использование Кленбутерола или Т3 для жиросжигания во время набора мышечной массы, но при этом натыкаются на несколько проблем, о которых не стоит беспокоиться вместе с GW 1516. И Т3, и Кленбутерол являются высоко катаболичными препаратами, а также проверенными врагами мышц. Оба препарата к тому же способны уменьшать сердечно-сосудистую производительность, при этом обладая выраженной способностью развития негативных побочных эффектов. Cardarine способен добавить в ваш курс только лишь положительные моменты, словно стоя особняком супротив других спорных препаратов.
Кардарин так же прекрасно пригодится во время подготовки к соревнованиям. При использовании Кардарина во время предсоревновательного курса, вы получаете возможность довести свою форму до идеала, посредством устранения бесполезного жира.
Другим отличным преимуществом Cardarine является его способность противостоять негативным эффектам Тренболона, направленных на уменьшение сердечно-сосудистой работоспособности. При добавлении в уравнение GW 501516, вы приобретаете возможность заниматься кардио даже на тренболоновом цикле, без каких-либо негативных влияний.
Курс Кардарина длится не более 12 недель при дозировках в районе 10-20мг ежедневно. Лучшим способом приёма GW 1516 является прём первой дозы утром, а второй, такой же по количеству, спустя 12 часов. Не плохой идеей будет принимать Кардарин перед тренировкой. GW действительно способен чудесно выполнять свою работу самыми различными способами, и именно поэтому должен быть включён в любой из ваших циклов.
GW-501516 (Cardarine) и Рак
Практически в каждом сообщении об применении GW-501516 (GW 1516 или Кардарин) на людях, кто-то просто обязательно упомянет об его канцерогенности. Данный аргумент главным образом базируется на исследовании, во время которых у крыс в следствии приёма GW 1516 развился рак, что является правдой лишь отчасти. При этом информация данными людьми подаётся неполноценно. Аргументами становятся какие-то факты, которые они читали в интернете, понимая, что, беря во внимание данные настоящих исследований, все их утверждения потеряли бы вес. Исследование, на которое зачастую ссылаются, изучало влияние сверхфизиологичного дозирования в размере 10мг/1кг веса, иными словами, мужчина весом 90кг должен был бы принимать 900мг GW-501516 ежедневно. Данная дозировка отрицает всякую разумную логику, не имея ничего общего с привычным дозированием равным 20мг/день.
В исследовании, упомянутом выше, крысы получали дозу эквивалентной 900мг Cardarine; это сравнимо с приёмом 14,625 мг аспирина ежедневно. Тогда как единичной дозой приёма аспирина считается всего 325мг (1 таблетка). Подобная дозировка способна буквально убить вас, забудьте вообще о раке!
Проблемные методы тестирования
Некоторые исследования, поддерживающие утверждения, будто GW 1516 вызывает пролиферацию раковых клеток у людей с генетической предрасположенностью, с самого начала являются ошибочными. Данное исследование было призвано подтвердить рост раковых клеток методом тестирования активности фермента, увеличение которого является индикатором роста опухолевых клеток. Проблема данного метода тестирования заключалась в том, что исследуемое вещество поднимает уровень рассматриваемого фермента внутри самой клетки. Из этого становится понятно, что судить о пролиферации клеток по активности фермента, после введения вещества, просто необъективно, так как результаты будут в значительной степени искажены. Однако, даже при отсутствии процесса увеличения клеток, усиление активности фермента кого-то определённо убедит в том, чего просто не было. Если говорить просто, это напоминает тестирование воды на наличие бактерий, методом добавления их в воду!
Научная основа связи кардарина с раком
Существуют сообщения, которые обвиняют GW-501516 в усилении канцерогенности самыми различными способами: усиление роста клетки путём ингибирования апоптоза (клеточной смерти), способствованию клеточной пролиферации (росту клетки), посредством повышения циклооксигеназы-2 (ЦОГ2) и/или сосудистого эндотелиального фактора роста (СЭФР). Данные отчёты обвиняют GW 1516 в ингибировании апоптоза раковых клеток толстой кишки; стимуляции пролиферации раковых клеток в человеческой печени, лёгких и простаты; усилении экспрессии ЦОГ2 в опухоли печени, а также увеличении выработки СЭФР в раковых очагах груди и толстой кишки. Как правило, данные отзывы ссылаются на спорный эксперимент, проведённый на крысах.
Научная основа, опровергающая связь Cardarine с раком
И хотя некоторые отчёты предоставляют аргументы в пользу рака, существуют ряд иных выводов, которые просто несовместимы с данной точкой зрения. К примеру, GW 501516 является противовоспалительным для многих видов клеток: эпителия толстой кишки, макрофагов, кардиомиоцитов, иммунных клеток, кератиноцитов, миобластов, эндотелиальных клеток и гепатоцитов. Данные так же показывают, что GW-1516 (Кардарин) способствует дифференциации кишечного эпителия, груди и раковых очагов толстой кишки, а также трофобластов и кератиноцитов. Это означает, что помощь клеткам становится более специализированной, естественным образом лимитируя рост клеток одного типа. Без данного ограничения, базовые клетки начнут внедряться в те области, которые им обычно не принадлежат. GW 501516 так же демонстрировал способность ингибировать рост клетки, во множестве из них.
Подводя итоги аргументов против рака:
GW1516 является противовоспалительным для многих клеток;
GW1516 ограничивает рак;
GW1516 ингибирует высокий рост клеток;
GW1516 уменьшает риск развития рака.
Исследование Кардарина
Исследование было проведено в попытке выяснить, откуда взялось такое большое количество несоответствий вокруг GW 501516. В эксперименте приняли участие три вида клеток толстой кишки и два вида печени, склонных к ракообразованию, которые были протестированы с использованием различных моделей. Модель 1, в присутствии или отсутствии сыворотки, и модель 2, в присутствии или отсутствии GW 1516, после чего изучили влияние спустя определённое время. Результаты были получены благодаря использованию метода Коултера, который является золотым стандартом подсчёта клеточной пролиферации. В соответствии с результатами эксперимента, все пять образцов не показали каких-либо изменений в клеточной пролиферации, что полностью опровергает любые улики, направленные на уличение PRAPов, таких как Cardarine, в канцерогенности.
5 900 Р